产品目录

罗丹明123是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料，是一种线粒体跨膜电位的指示剂。其在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质，荧光强度减弱或消失。而在凋亡发生时，线粒体膜完整性破坏，线粒体膜通透性转运孔开放，引起线粒体跨膜电位(△4m)的崩溃，Rh123重新释放出线粒体，从而发出强黄绿色荧光，可用荧光显微镜、荧光光度计或流式细胞仪检测，通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化和凋亡的发生，可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。

• 操作时需戴手套。
  
• 罗丹明123为通透性染料，可以自由进入细胞。
  
• 孵育时，必须避免光照。
  
• 使用时，避免污染母液。
  
• 染色完成后，即刻进行荧光检测分析。

• 细胞染色及分析
  
  • 培养细胞1×10%/mL重悬于培养基中；
    
  • 加入罗丹明123染液0.1μg/mL～50μg/mL(根据细胞种类不同而浓度不同，一般3～10μg/mL)；
    
  • 37℃，5% CO₂细胞培养箱孵育1～30mm(根据细胞种类不同而不同，一般10mm)；
    
  • 离心以培养基洗细胞两次；
• 组织提取的线粒体染色及分析
  
  • 按常规方法提取的线粒体，用适量的1×Assays Buffer(将5×Assays Buffer用水稀释5倍)重悬；
    
  • 常规方法进行蛋白含量测定后，用1×Assays Buffer调配成3mg/mL的线粒体溶液；
    
  • 取2mL 1×Assays Buffer和1mL线粒体溶液；
    
  • 加入适量待测化合物(同时设空白对照组)，250℃保温min；
    
  • 加入罗丹明123染液10μL；
    
  • 荧光光度计检测：上述混合液全部加入石英比色皿中，置于250C下测定，激发波长488～505mm，发射波长530nm，连续记录从0min～30min内荧光强度的变化。